培养条件：气相环境为95%空气加5%二氧化碳，培养温度设定在37℃。培养基选择1640培养液，配方中添加2mM L-谷氨酰胺，调整后含有15g/L的碳酸钠、45g/L的葡萄糖、10mM的HEPES和10mM的钠丙酮酸，并额外补充0.05mM的2-巯基乙醇和0.4mg/ml的G418，最终FBS（胎牛血清）含量为10%。

传代方法：首次传代建议使用1:2的比例。传代周期为2天，期间需更换培养液。在培养过程中，注意观察细胞生长状况。接收到细胞后，需核实培养瓶上的细胞名称与订单一致，并检查瓶子是否完好无损。如果未发现异常，使用显微镜观察细胞生长情况并拍摄不同倍数的照片（建议40x、100x、200x各一张）以作为后续的重要售后依据。

细胞处理：细胞状态良好时，注满完全培养液并封闭瓶口，这是运输细胞的最佳方案。在处理细胞时，首先弃去培养基，然后用不含钙、镁离子的PBS缓冲液洗涤细胞1-2次。接下来，添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中，在37℃温育1-2分钟，观察细胞情况，细胞转圆并脱落后，轻敲培养瓶加入至少5ml的完全培养基以终止消化。完成后，轻微吹打细胞以确保完全脱落，然后转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清，重悬细胞于1-2ml的完全培养基中。

分瓶传代：将细胞悬液按1:2的比例分装到新的T25培养瓶中，添加6-8ml的全新培养基，最后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中继续培养。

细胞冻存：当细胞生长至培养瓶80%面积时，弃去培养液，用PBS清洗后，添加0.25%胰蛋白酶消化液，观察细胞回缩变圆，加入完全培养基终止消化，转移悬液至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清后添加雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转入冻存管中。

解冻细胞：将冻存管从液氮中取出（注意佩戴防护面具），迅速将其置于37℃水浴中解冻。解冻后，将内容物转移至含有5ml完全培养基的离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，重悬细胞，并接种至T25培养瓶中，放入37℃、5%CO2细胞培养箱继续培养。第二天，换用新鲜完全培养基以继续培养。

注意事项：在运输过程中，细胞可能因贴合不牢而脱落，这属于正常现象。若脱落较多，可将培养液收集至离心管中处理，并按上述步骤进行再次处理与分瓶传代。同时，为确保细胞活性，建议在收到Z6·尊龙凯时的细胞产品的当天及随后2-3天内拍照记录，并在出现问题时及时反馈。

若细胞出现问题，重发的情况包括运输过程中的细胞损失、污染等，请在收到产品48小时内提出真实实验结果。在细胞活性方面，需在产品收到7天内提供实验结果进行核实。若未及时反馈或未提供必要的照片，则视为产品状态合格，Z6·尊龙凯时将尽力为您提供优质服务和支持。